Получение

Известно несколько способов получения биомасс энтомопатогенных нематод.

1. Смешивают компоненты питательной среды – дрожжи, кукурузное масло, яичный порошок, соевую муку и воду, помещают в ферментер и стерилизуют. Жидкую культуру симбиотических бактерий размножают в другом ферментере. Первую смесь охлаждают и в нее инокулируют размноженную культуру. Бактерии выращивают в питательной среде 48 часов, после чего в среду инокулируют предварительно простерилизованную моноксенную культуру инвазионных личинок нематод. По окончании цикла развития зрелую биомассу нематод с помощью центрифугирования отделяют от остатков питательной среды^[4].
2. Биомассу нематод получают с использованием полужидких питательных сред. Они могут состоять из а) говяжий жир, куриные потроха, вода; б) кукурузная мука, куриные яйца, дрожжевой экстракт, растительное масло, вода. Гомогенатом питательной среды пропитывают поролоновую крошку, куда после стерилизации были инокулированы симбиотические бактерии. При температуре 25–30°C бактерии размножают в течение 2–3 суток, после чего моноксенную культуру нематод инокулируют в емкость^[4].
3. Энтомопатогенные нематоды и их симбиотические бактерии могут быть выращены в емкостях имеющих естественную аэрацию на твердом инертном носителе (поролоновой крошке), который пропитан гомогенатом искусственной питательной среды. Состав среды: растительное масло (кукурузное, рапсовое, подсолнечное) – 5%, соевая мука – 16%, вода – 50%, пивные дрожжи – 1%, поролоновая крошка – 8% с адаптогеном – дибазолом (2-бензил-бензимидазол) (концентрация 1×10^-9 г/мл). В питательную среду одновременно инокулируют симбиотических бактерий и моноксенную культуру инвазионных личинок нематод. Дибазол в питательной среде призван способствовать увеличению резистентности организмов к неблагоприятным условиям культивирования, которые отличаются от условий развития нематод в насекомых. В течение 20–30 дней емкости с питательной средой инкубируют при 20–28°С. Из поролоновой крошки нематод выделяют вымыванием^[4].

Выход биомассы нематод составляет 920,0 тыс. инвазионных личинок с 1 грамма питательной среды. Значение показателя энтомопатогенной активности нематод составляет LD₅₀ = 22,0 + 2,7^[4].