Действие на вредные организмы

Вирус ядерного полиэдроза хлопковой совки – обладает видоспецифичным инсектицидным действием на многоядного вредителя Хлопковая совка^[6].

Механизм действия

В настоящее время в группу включены виды вирусов:

• Cydia pomonella GV;
• Thaumatotibia leucotreta GV;
• Anticarsia gemmatalis MNPV;
• Helicoverpa armigera NPV^[12].

Механизм действия вирусов насекомых, отнесенных к группе 31 классификации IRAC основан на взаимодействии белкового комплекса на поверхности вириона, уникального для каждого вида вируса, с мишенями, специфичными для вида насекомого и вида вируса, в организме насекомых, что приводит к возникновению видоспицифичных инфекций, заканчивающихся летальным исходом^[12].

Полиэндры вируса ядерного полиэндроза хлопковой совки при попадании в кишечник гусениц под воздействием щелочного кишечного сока, а точнее его протеолитических ферментов растворяются и высвобождают вирионы. Последние в кишечнике распадаются на еще более мелкие частицы – провирусы. Они способны проникать сквозь стенки средней кисшки в полость тела насекомого и разносится гемолимфой по всему телу и проникать в восприимчивые ткани различных органов. Чаще всего поражаются клетки жирового тела, эпителий трахей, гиподерма, нервные клетки, гонады, придаточные железы к мальпигиевым сосудам, мышечная ткань^[5].

В течение не более 12 часов после инфицирования вирусные частицы внедряются в клетки – голые провирусы прикрепляются к мембране ядра в области поры. Затем вирус проникает в ядро, где быстро растет и размножается за счет хроматина и других компонентов ядра. Через 24–26 часов после инфицирования можно наблюдать гипертрофию ядер и образование большого числа голых вирусных палочек, позднее образуются мембраны^[5].

Часть вирионов перемещаются в сформированную в ядре вирусную строму, где создаются полиэдры. Заполнение ядра клетки полиэдрами наблюдается до разрыва его оболочки. Полиэндрические белковые включения вируса выходят в цитоплазму инфицированной клетки, по мере накопления разрушают оболочку клетки и оказываются в полости тела насекомого. Вирионы, по каким-то причинам не объединенные в полиэндры разносятся током гемолимфы и инфицируют неповрежденные клетки. Патогенез обычно длится от трех до двенадцати дней в зависимости от возраста гусениц, дозы вируса, погодных условий^[5].

Патогенез заболевания заканчивается гибелью гусениц, поскольку к этому времени все инфицированные клетки разрушены, внутренние органы и ткани лизированы и превращены в беловато-желтоватую жидкость, содержащую большое количество полиэндров. Эта жидкость не имеет запаха, что является одним из предварительных диагностических признаков заболевания. Однако пользоваться этим признаком долгое время невозможно, поскольку в естественных условиях на трупах насекомых развивается сапрофитная флора и появляется гнилостный запах^[5].

Наиболее чувствительны к Helicoverpa armigera NPV гусеницы младших возрастов. В первом возрасте они легко заражаются даже небольшими дозами возбудителя, достаточно на одну гусеницу несколько полиэндров. Для второго возраста для инфицирования требуется несколько сотен полиэндров на особь. В фазе предкуколки, куколки и имаго насекомые характеризуются относительно высоким уровнем устойчивости к заражению^[5].

Воздействие вируса ядерного полиэндроза хлопковой совки губительно действует на популяцию вредителя. Отмечается, что после прошедших эпизоотий в популяциях насекомых в течение многих лет наблюдаются глубокие депрессии^[5].

Получение

Изолят ВЯП ХС выделен в 2012 году в инсектарии при активации латентной инфекции III возраста лабораторно популяции Хлопковой совки. Из погибшей от полиэндроза гусеницы изготовили гомогенат, из которого методом грубой очистки был выделен образец ВЯП^[4].

ВЯП ХС-18 был получен путем слепого пятикратного пассирования образца на личинках хлопковой совки путем заражения и приготовления гомогената из погибших личинок. На седьмые сутки после инфицирования из каждого пассажа для проведения дальнейшего пассирования отбирали вирус, выделенный из одной погибшей гусеницы^[4].

Для установления генотипа штамма ХС-18 образцы материла были секвенированы на Ion Torrent PGM («Life Technologies»). Полученные последовательности выравнивались на прототипные из международной базы данных GenBank^[4].