Класс Вироиды

Структура

Молекула вироидов – имеет небольшие размеры и состоит из односпиральной, ковалентной, замкнутой структуры с участками из двухспиральных сегментов (спаренных оснований). Молекулярная масса обычно не превышает 150 КДальтон^[2]. Вероидная РНК состоит из 250 – 400 нуклеотидов^[1].

Биология

Вироиды – наиболее примитивная форма патогенов, наименьшая из известных, по размерам. Эти патогены не способны самостоятельно кодировать синтез специфических белков^[2].

Вироидная РНК может реплицироваться автономно за счет биохимических механизмов хозяина. Однако, она обладает высокой стабильностью к физическим и химическим факторам. Так, они устойчивы к температуре свыше 100°C, спиртам, фенолам^[1][2].

При интенсивном использовании биоресурсов вироиды проявляют тенденцию к распространению^[2].

Вироиды способны передаваться контактно-механическим путем, с прививкой, пыльцой, семенами, насекомыми, растениями-паразитами (повиликой). Они инфицируют преимущественно Двудольные растения^[1].

Методы диагностики вироидных болезней

Выявление и идентификация вироидозов затруднена. Однако разработано несколько достаточно надежных методов точного определения патогена^[1].

Визуальная диагностика – данный метод часто затруднен бессимптомным характером развития заболевания. Симптоматика зависит от многих факторов: агрессивности штамма, внешних условий, продолжительности заражения. Кроме того, поражения вироидами часто сходны с заболеваниями, вызванные другими причинами: недостатком или избытком минерального питания, избытком регуляторов роста, гербицидов. Точная идентификация вироидозов методами визуальной диагностики невозможна^[1].

Метод индикаторных растений – широко распространен. Он основан на использовании растений-индикаторов, способных давать четкие, специфичные симптомы, характерные для определенного патогена. Заражение травянистых растений проводится путем механической инокуляции соком и проявляется в форме местных некрозов, иногда наблюдается угнетение роста или изменение окраски.

Соконепереносимые патогены прививают различными методами. Иногда для передачи вироидов используют насекомых и повилику^[1].

Метод электронной микроскопии – исследования проводят с помощью электронных микроскопов. В ультратонких срезах растений, иногда в осветленном соке определяют форму, строение и размеры вироидов. Метод используют редко из-за высокой стоимости оборудования и реактивов^[1].

Метод электрофореза – основан на разделении очищенных нуклеиновых кислот вироида в геле под действием электрического тока, с последующим окрашиванием. Этот метод позволяет определить массу и размеры вироидных структур. Метод используется для визуального исследования продукта полимеразной цепной реакции. Регистрация полученных результатов производится путем фотографирования геля в отраженном или проходящем свете^[1].

Молекулярно-биологические методы – основываются на знании строения молекулы РНК или ДНК вироида. Самый распространенный тест – амплификация (умножение) видоспецифичных последовательностей РНК в ходе полимеразной цепной реакции. Выделенные фрагменты РНК, многократно умножают при помощи ферментов в присутствии праймеров (олигонуклеотидов). Затем РНК и ДНК обнаруживают методом электрофореза в геле или методом иммунофлуоресценции. Этот метод широко распространен в практических работах вирусологов^[1].

Метод ДНК-зондов – основан на принципе комплементарности нуклеиновых кислот. Синтезируют специфичные зонды, способные гибридизироваться только с определенными нуклеотидными последовательностями РНК вироида. В зависимости от выбора зонда возможна дифференциация группы, вида и штамма вироида^[1].

Распространение

Вироиды – широко распространены по всему земному шару^[2].

Вредоносность

Вироиды – инфекционные агенты, относящиеся к экономически значимым фитопатогенам. Вызываемые ими заболевания носят наименование – «вироидозы». Число заболеваний, вызываемых вироидами на растениях, постоянно расширяется. В 1987 году их насчитывалось только 13. К 2003 году выявлено около 30 возбудителей этой группы, в том числе 8 на плодовых культурах. Эти заболевания наносят значительный вред картофелю, томату, баклажану, огурцу^[1][2].

Вредоносность вероидных заболеваний велика. На Филлипинах от заболевания пальм «кадаг-кадаг» потери достигают 16,6 миллионов долларов в год^[2].