Pseudomonas solanacearum

Распространение

Pseudomonas solanacearum – бактерия широко распространена и причиняет наибольший вред в условии теплых, влажных регионов. Главным образом это субтропики и тропики^[2].

Культивирование

Выделение бактерий Pseudomonas solanacearum проводят из пораженных органов подсолнечника, картофеля или других растений с явными симптомами бактериального увядания^[3].

Инкубация проводится в течение 4–7 суток при температуре +28°C. Колонии пересевают на питательные среды и используют для дальнейших исследований или хранения^[3].

Для рода Pseudomonas первичный анализ рекомендуется проводить по системе LOPAT (леван, оксидаза, разжижение картофеля, аргининдигидролаза, реакция сверх чувствительности) и флуоресцирующему пигменту на среде Кинга Б^[3].

Патогенность и вирулентность изучают в тепличных условиях или в камерах искусственного климата^[3].

Уточнение видовой принадлежности проводят с помощью праймеров, указанных в руководстве доктора Шаада, 2000 года^[3].

Для выделения бактерии рода Pseudomonas рекомендуется использовать следующие среды:

1. KBC: 20,0 г/л – пептон; 1,5 г/л – K₂HPO₄; 1,5 г/л – MgSO₄.7H₂O; 10,0 мл – глицерола; 100,0 мл – 0.5% водный раствор борной кислоты^[3].
2. Картофельный агар с генциан-виолетом: 0,1 мл генциал-виолет (0,1% водный р-р);1 л бульона картофельного (1 л воды + 300 г вымытого и очищенного картофеля)^[3].

Колонии Pseudomonas solanacearum на мясопептонном агаре растут быстро с образованием небольшой пленки на поверхности. Сначала они дают штрих белого или грязно-белого цвета, в последствии темнеющий до коричневого. Агар при этом окрашивается в коричневый цвет^[2].

Колонии на вареном картофеле – белые, затем желтеют, становятся коричневыми и через 3–10 дней почти черными. Интенсивность окрашивания тем выше, чем больше среда содержит глюкозы. Продолжительность жизни на картофеле – 8–14 дней^[2].

На щелочных растворах с пептоном темная окраска колоний появляется только в присутствии сахара^[2].

Pseudomonas solanacearum – крахмал не растворяют, но частично превращают в амилодекстрин, что устанавливается по красной окраске с идолом. Диастаническая активность бактерий слабая. На картофеле дают слабый неприятный запах. Молоко не створаживается, но слабо пептонизируется через 3–7 недель. Лакмусовое молочко окрашивается в синий цвет на 2–3 день с усилением окраски через 28 дней до цвета индиго^[2].

Бактерии не образуют газ и кислоту на декстрозе, лактозе, сахарозе, мальтозе. Нитраты редуцируются без образования газа. Идол не образуется. Аммиак и сероводород образуются. В среде Кона бактерии не растут^[2].

Оптимальная температура для роста и развития Pseudomonas solanacearum +35°C–+37°C, минимальная +10°C, максимальна +41°C, термальная точка отмирания около +52°C. Микроорганизм очень неустойчив, на искусственных средах быстро теряет вирулентность и скоро отмирает. Долго, до 140 дней, сохраняется в молоке пастеризованном при +100°C^[2].